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液相色谱仪系统
点击次数:2148 更新时间:2018-03-27
   液相色谱仪系统
  器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为供的信号,常用器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
  1.紫外见吸收器
  紫外见吸收器(UVD)是HPLC中应用zui的器之一,所有的液相色谱仪配有这种器。其点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对吸收物质限1ng,后不破坏样品,用于制备,并能与器串联使用。紫外见器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有活动地的紫外见光度计。
  (1)紫外吸收器
  紫外吸收器常用氘灯作光源,氘灯则发出紫外-见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm~800nm)。它有两个流通池,一个作参比,一个作丈量用,光源发出的紫外光照到流通池上,若两流通池通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下吸收,光电管上接受到的辐度相等,信号输出。当组分进进丈量池时,吸收的紫外光,使两光电管接受到的辐度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
  局限:活动相的选择受到限制,即具有紫外吸收的溶剂不能做活动相,每种溶剂有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降10%以下,因此,紫外吸收器的工作波长不能小于溶剂的截止波长
  (2)光电二极管阵列器
  也称扫描紫外见分光器,是一种的光吸收式器。它采用光电二极管阵列作为元件,构成多通道并行工作,同时由光栅分光,再进到阵列式接收器上的波长的光信号,然后对二极管阵列扫描采集数据,得到吸收值(A)是保存时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。由此及时观察与每一组分的色谱图相应的光谱数据,从而迅速决定具有*选择性和灵敏度的波长。
  2.荧光器(fluorescence detector,FD)
  荧光器是一种高灵敏度、有选择性的器,能产生荧光的化合物。某些不发荧光的物质通过化学衍生化天生荧光衍生物,再进行荧光。其zui小浓度0.1ng/ml,适用于痕量分析;一般情况下荧光器的灵敏度比紫外器约高2个数目,但其线性范围不如紫外器宽。
  近年来,采用激光作为荧光器的光源而产生的激光诱导荧光器地增了荧光的信噪比,因而具有很高的灵敏度,在痕量和痕量分析中得到应用。
  3.示差折光器
  示差折光器是一种浓度型通用器,对所有溶质有响应,某些不能用选择性器的组分,如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等,用示差器。示差器是基于连续测定样品流路和参比流路之间折率的变化来测定样品含量的。光从一种介质进进另一种介质时,由于两种物质的折率不同就会产生折。只要样品组分与活动相的折光指数不同,就被,二者相差愈大,灵敏度愈高,在浓度范围内器的输出与溶质浓度成正比。
  4.电化学器
  电化学器主要有安培、极谱、库仑、电位、电导等器,属选择性器,具有电活性的化合物。目前它已在各种机和阴阳离子、生物组织和体液的代谢物、食品添加剂、环境污染物、生化制品、农药及药等的测定中获
  得了的应用。其中,电导器在离子色谱中应用zui多。
  电化学器的优点是:
  ①灵敏度高,zui小检丈量~般为ng,有目pg;
  ②选择性好,测定大量非电活性物质中极痕量的电活性物质;
  ③线性范围宽,一般为4~5个数目;
  ④设备简单,本钱较低;
  ⑤易于自动操纵。

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