一起了解下高效液相色谱仪的数据处理方法
点击次数：1427 更新时间：2022-12-29
高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理，主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。HPLC广泛应用于生命科学、食品科学、药物研究以及环境研究中。
高效液相色谱仪的校正是通过分析制备的标准样品来确定计算绝对组分浓度的响应系数的过程。
1.外标法：外标法是在空白样品中加入一定量的标准物质作为对照样品，与未知样品同时进行样品处理和检测，并计算出被检测成分的浓度的定量方法。根据对照品响应值与标准品浓度函数的关系，测定未知试样中的成分。
2.内标法：内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加入一定量的被测样品混合物中，对含有内标物的样品进行高效液相色谱仪分析，测定峰面积和相对含量。分别测定内标物和受试物的有效校正系数，并按公式计算受试物的含量。
两种适合的数据处理方法的差别为高效液相色谱仪：内部标准方法是将标准的标准物质作为要求的内部条件，并以合适的操作条件对样品进行严格的试验和试验结果的检验，但对样品的准确操作条件和试验结果的分析必须是严格的，而对样品的内部标准则不需要对样品进行严格的校正。
