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岛津液相色谱仪工作中如何避免出现干扰峰的问题?
点击次数:1554 更新时间:2022-05-13
  岛津液相色谱仪中的干扰峰是广大色谱工作者头疼的问题。那么在它的工作中怎么避免出现这类的问题呢?
  

岛津液相色谱仪

 

  1、试剂/溶剂
  
  在高效液相色谱中,常用的试剂主要是有机溶剂、各种盐类和水。大多数有机溶剂都是购买色谱级的,所以出现问题的概率很小。但由于重复使用,分装有机溶剂被污染的概率较高,因此引入干扰峰的概率较高。二是水。水中的杂质是干扰峰的主要来源之一,很容易被忽略。对于采集波长较低的检测方式,推荐使用优质水,可以避免很多水质问题。三是盐类种类繁多,也是色谱干扰峰的主要来源之一。
  
  对于水和无机盐造成的干扰峰,较快的解决办法是加装鬼峰补充收集柱,可以有效避免这种干扰。如果使用离子对试剂,应选择不影响离子对试剂的鬼峰互补柱。
  
  2、设备
  
  干扰峰来源的第二个方面是流动相制备和样品预处理过程中的各种设备。
  
  首先是岛津液相色谱仪制备流动相时接触的设备,包括烧杯、玻璃棒、pH计、滤杯、滤膜、流动相瓶等。烧杯和玻璃棒是制备流动相的接触设备。因此,建议仅使用制备流动相的烧杯和玻璃棒。滤杯测试仪只要清洗干净,就不会带来污染。需要注意的是,如果含有离子对的流动相被过滤,建议增加清洗次数,以免污染后续流动相。因此,对滤杯的清洗应建立基本的清洗程序,以保证实验室人员对所用设备的清洗到位,滤膜也是干扰峰的来源之一。乙腈经有机滤膜过滤后,梯度洗脱中会引入较大的干扰峰。由于色谱级试剂的生产厂家已经过膜,而且大部分仪器都有脱气装置,所以建议无需过滤甲醇、乙腈等纯有机相。流动相瓶中引入干扰峰的现象主要发生在夏季,这是由于夏季气温高,纯水相易滋生所致。后续流动相瓶因用户未正确清洗,导致引入干扰峰。因此,流动相瓶的清洗应建立严格的清洗程序。
  
  重新在岛津液相色谱仪样品预处理期间接触的设备。预处理时接触的设备主要有容量瓶、滤头、注射器和注射瓶。容量瓶的清洗与流动相瓶和过滤装置的清洗相同。应建立良好的清洁程序。输液设备、滤头和注射器多为塑料制品,其化学惰性比玻璃制品差,容易引入干扰峰。
  
  3、液相系统
  
  与前两种干扰峰相比,液相系统的干扰峰更难求解。液相系统是一个动态过程,因此解决此类问题的过程需要很长时间,并且对实验室人员的色谱素养要求很高。此类问题的来源可分为三类:强滞留物质、离子对污染和管道滋生。
  
  一是强保留物质的干扰,主要表现为宽峰。这些问题大多出现在等度洗脱中,梯度洗脱主要出现在高比例的有机溶剂中。这是因为强滞留物质在本次注射中没有被洗掉,而在随后的注射中被洗脱出来。

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